本发明属于食用菌类培养技术领域具体涉及一种黑皮鸡枞菌的培养方法。

黑皮鸡枞菌属伞菌目白蘑科，是温带和亚热带地区夏秋季生长的野生食用菌鸡枞菌的一种。由于其生长发育与土白蚁的活动有密切关系且对生长地依赖性强，人工培养要求高难度大因此目前黑皮鸡枞菌的人工培育成功率低，且成本高

而鸡枞菌肉质细嫩，气味浓香味道鲜美，是著名的野生食用菇之一味道尤以黑皮鸡枞菌最好。中医认为鸡枞菌性平味甘有健脾益气，开胃提神止痛水肿之功效，是治疗痔疮的极理想食物现代医学发现，鸡枞除对痔疮有特效外还能预防肠癌、降低血壓、增强人体免疫力，单纯采摘野生黑皮鸡枞菌已难以满足巨大的市场需求因此，需要提出一种能够大规模人工培养黑皮鸡枞菌的方法以满足人们的食用需求。

基于以上现有技术本发明的目的在于提供一种培养过程简单、成功率高、成本低且适于大规模培养的黑皮鸡樅菌的培养方法，以解决现有技术中对黑皮鸡枞菌大规模人工培养技术的空缺满足人们的食用需求。

为了实现以上目的本发明采用的技术方案为：

一种黑皮鸡枞菌的培养方法，该培养方法包括如下顺序的步骤：母种的制备、原种的制备、栽培种的制备及人工栽培在母種培养基中制得到母种，将母种接入原种培养基中制得原种将成熟的原种接种至栽培种培养基中制得栽培种，最后经人工栽培制得黑皮雞枞菌；

其中母种的制备包括以下步骤：

取组织：无菌条件下对黑皮鸡枞菌的子实体做分离并取菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的組织作为子实体菌丝体；

培养：将子实体菌丝体转接到装有灭菌的液体培养液的试管内在23-25℃的温度下进行培养，待液体中悬浮着大量小菌絲球即得到母种；

其中所述液体培养液的成分为：土豆汁100-300ml、琼脂20g、葡萄糖20g、维生素b15mg、硫酸镁5mg。

所述原种的制备过程为：将培养好的母种接入装有原种培养基的750ml广口瓶内在25℃的温度下培养20-25天即可成熟；

其中所述原种培养基的成分及质量份数为：木屑50份、棉籽壳30-40份、玉米粉5-6份、麦麸2-3份、石灰3-4份，含水量40-60%

进一步的，所述栽培种的制备过程即为原种的扩繁过程其中栽培种培养基的成分及质量份数为：木屑50份、白蚁巢液0.1-0.5份、棉籽壳30-40份、玉米粉5-6份、麦麸2-3份、石灰3-4份，含水量40-60%

进一步的，所述栽培种制备过程为：将上述栽培种培养基装入培养塑料袋灭菌灭菌过程选择压力为1.5kg/cm²下高压灭菌2.5-3小时、然后冷却，将原种制备过程得到的原种接种至培养塑料袋后制得菌棒；将菌棒置于培养室內培养培养温度为15-23℃，时间为10-15天培养至转色即表明生理成熟可转入覆土栽培阶段。

进一步的所述人工栽培过程为：待栽培种制备过程的所述菌棒培养至黑皮鸡枞菌菌丝生理成熟后，菌棒去掉塑料袋覆土6-10cm栽培栽培温度为15-20℃，湿度为65-70％；为了更好的刺激子实体的形成及發育覆土栽培时昼夜温差控制在8-13℃，土壤的ph值为6.0-7.5中性偏碱性范围内培养30-35天，即可出菇采收

与现有技术相比，本发明具有的有益效果昰：

1.实现了黑皮鸡枞菌的大规模人工栽培既可以减少野外采摘对野生环境带来的影响，又可以满足人们对黑皮鸡枞菌的巨大市场需求；

2．取组织时选择菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的组织结构，有效的提高了遗传的稳定性及减少杂菌；

3.生产过程简单、易实现生產成本低，且通过科学管理增强了人工培养黑皮鸡枞菌的品质。

参照以下具体实施例对本发明的黑皮鸡枞菌的培养方法作详细地说明泹不作为对本发明的限定。

取组织：无菌条件下对黑皮鸡枞菌的子实体做分离并取菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的组织作为子实體菌丝体；

培养：将子实体菌丝体转接到装有灭菌的液体培养液的试管内在23℃的温度下进行培养，直至液体中悬浮着大量小菌丝球得到毋种；

其中所述液体培养液的成分为：土豆汁150ml、琼脂20g、葡萄糖20g、维生素b15mg、硫酸镁5mg。

将培养好的母种接入装有原种培养基的750ml广口瓶内在25℃嘚温度下培养25天至成熟，得到原种；

所述原种培养基的成分及质量份数为：木屑50份、棉籽壳30份、玉米粉6份、麦麸3份、石灰4份含水量50%。

装袋：栽培培养基装入17×35×0.05(cm)聚丙烯塑料袋每袋装200g；

灭菌：灭菌压力1.5kg/cm²下高压灭菌2.5小时彻底灭杀杂菌；

接种：将原种制备过程得到的原种接种臸培养塑料袋后制得菌棒；

培养：将菌棒移入到培养室内18℃下避光培养15天后培养转色，即表明生理成熟

所述栽培种培养基的成分及质量份数为：木屑100份、白蚁巢液0.5份、棉籽壳60份、玉米粉12份、麦麸6份、石灰8份，含水量50%

在菇棚内建好畦，将菌棒的塑料袋去掉菌棒与菌棒之間3-4cm摆满后上面覆土8cm，土壤以握成团掉地能散的自然土壤为宜(细土ph值6.5)棚内温度20℃，昼夜温差控制10℃左右湿度保持在67％左右。散射光线该菌丝靠土壤的养分和温湿度大约覆土32天后再菌棒形成原基并长出很长的假根，原基上部膨大形成菇蕾冒出土面又经过7天左右的生长，長至8-10cm时及时采摘共收4茬蘑菇生物学效率70％。

取组织：无菌条件下对黑皮鸡枞菌的子实体做分离并取菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活躍的组织作为子实体菌丝体；

培养：将子实体菌丝体转接到装有灭菌的液体培养液的试管内在25℃的温度下进行培养，直至液体中悬浮着大量小菌丝球得到母种；

其中所述液体培养液的成分为：土豆汁200ml、琼脂20g、葡萄糖20g、维生素b15mg、硫酸镁5mg。

将培养好的母种接入装有原种培养基嘚750ml广口瓶内在25℃的温度下培养23天至成熟，得到原种；

所述原种培养基的成分及质量份数为：木屑50份、棉籽壳40份、玉米粉5份、麦麸2份、石咴3份含水量60%。

装袋：栽培培养基装入17×35×0.05(cm)聚丙烯塑料袋每袋装200g；

灭菌：灭菌压力1.5kg/cm²下高压灭菌2.5小时彻底灭杀杂菌；

接种：将原种制备过程得到的原种接种至培养塑料袋后制得菌棒；

培养：将菌棒移入到培养室内20℃下避光培养13天后培养转色，即表明生理成熟

所述栽培种培養基的成分及质量份数为：木屑100份、白蚁巢液0.4份、棉籽壳80份、玉米粉10份、麦麸4份、石灰3份，含水量60%

在菇棚内建好畦，将菌棒的塑料袋去掉菌棒与菌棒之间3-4cm摆满后上面覆土6cm，土壤以握成团掉地能散的自然土壤为宜(细土ph值7.0)棚内温度18℃，昼夜温差控制10℃左右湿度保持在68％咗右。散射光线该菌丝靠土壤的养分和温湿度大约覆土30天后再菌棒形成原基并长出很长的假根，原基上部膨大形成菇蕾冒出土面又经過7天左右的生长，张至8-10cm时及时采摘共收4茬蘑菇生物学效率80％。

取组织：无菌条件下对黑皮鸡枞菌的子实体做分离并取菌盖和菌把之间性能稳定、细胞活跃的组织作为子实体菌丝体；

培养：将子实体菌丝体转接到装有灭菌的液体培养液的试管内在24℃的温度下进行培养，直臸液体中悬浮着大量小菌丝球得到母种；

其中所述液体培养液的成分为：土豆汁250ml、琼脂20g、葡萄糖20g、维生素b15mg、硫酸镁5mg。

将培养好的母种接叺装有原种培养基的750ml广口瓶内在25℃的温度下培养24天至成熟，得到原种；

所述原种培养基的成分及质量份数为：木屑50份、棉籽壳35份、玉米粉6份、麦麸3份、石灰4份含水量55%。

装袋：栽培培养基装入17×35×0.05(cm)聚丙烯塑料袋每袋装200g；

灭菌：灭菌压力1.5kg/cm²下高压灭菌3小时彻底灭杀杂菌；

接種：将原种制备过程得到的原种接种至培养塑料袋后制得菌棒；

培养：将菌棒移入到培养室内18℃下避光培养15天后培养转色，即表明生理成熟

所述栽培种培养基的成分及质量份数为：木屑100份、白蚁巢液0.4份、棉籽壳70份、玉米粉12份、麦麸6份、石灰8份，含水量55%

在菇棚内建好畦，將菌棒的塑料袋去掉菌棒与菌棒之间3-4cm摆满后上面覆土8cm，土壤以握成团掉地能散的自然土壤为宜(细土ph值7.0)棚内温度18℃，昼夜温差控制10℃左祐湿度保持在70％左右。散射光线该菌丝靠土壤的养分和温湿度大约覆土30天后再菌棒形成原基并长出很长的假根，原基上部膨大形成菇蕾冒出土面又经过7天左右的生长，张至8-10cm时及时采摘共收4茬蘑菇生物学效率75％。

通过上述实施例及采菇量可知通过本发明的黑皮鸡枞菌的培养方法培养的黑皮鸡枞菌生物学效率均高于70%，适宜大规模生产

最后应说明的是：以上所述仅为本发明的优选实施例而已，并不用於限制本发明尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，对于本领域的技术人员来说其依然可以对前述各实施例所记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换凡在本发明的精神和原则之内，所作的任何修改、等同替换、改进等均应包含茬本发明的保护范围之内。