1582年夏天、信长准备派三男神户信孝、重臣丹羽长秀等军团进攻四国的长宗我部元亲关于明智光秀的异心，有一说是光秀认为自己未被赋予进攻四国的任务而开始有“洎己被放置一旁。会不会像林秀贞、佐久间信盛一样被放逐”的被害妄想。另一说是光秀以前曾受信长命令636f616f36负责与长宗我部元亲的和睦工作，为此命令奔走以改善彼此关系的光秀将属下斋藤利三之妹嫁予元亲但结果却往武力讨伐的方向发展，光秀因此感到名誉受损、倍感屈辱

1582年5月15日、德川家康为了骏河国领地增加的宴会抵达安土城。信长派明智光秀负责接待光秀从15日到17日专注于接待家康。在家康停留的这段期间正在攻打备中高松城的羽柴秀吉派使者向信长要求援军，并提到“毛利军有率大军往高松城救援的动作”

信长答应派兵后，解除光秀的接待任务改命其带兵前往援助秀吉。据《明智军记》所记载因光秀准备的接待餐宴质量不佳，信长令其随从森兰丸敲光秀的头

5月29日，信长为准备出兵远征毛利而前往京都、之后则逗留于本能寺但派往援助秀吉的明智光秀军却突然出现在京都于6月2日襲击本能寺。当时因属下兵力对信长的信赖较深，誓言效忠明智光秀的人很少的缘故光秀于进攻本能寺时，并没有告诉部下攻击的目標是信长据言率领约100人的信长本身亦持枪奋战，负伤后返回房内自杀（本能寺之变）。享年49

当时本能寺为大火烧毁，通说是认为信長已死于寺中但明智光秀的女婿明智秀满遍寻不至信长遗体，有一说是信长遗体已被仰慕信长的僧侣与部下秘密地埋葬了

其长子织田信忠得知消息后，于附近的二条御所抵抗明智军最后亦不敌自杀。而黑人兵弥助在本能寺之变中直到最后都和信长一同奋战。为光秀所擒后被赦免

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